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1526 人阅读发布时间:2025-03-11 14:15
cfDNA(cell-free DNA)即游离 DNA,是指存在于细胞外的 DNA,它在血液、唾液、尿液等多种生物体液中都有存在。
cfDNA 主要来源于细胞凋亡、坏死或主动分泌等过程释放到细胞外的 DNA 片段。在血液中,它主要存在于血浆或血清中,与血细胞等成分相分离。此外,在其他生物体液如脑脊液、胸腔积液、腹水等中也能检测到 cfDNA。
利用酚、氯-仿等有机溶剂对蛋白质和核酸的不同溶解性,通过多次抽提使蛋白质等杂质溶解于有机相,而 DNA 则保留在水相,再通过乙醇沉淀等步骤获得纯化的 cfDNA。该方法的优点是提取的 DNA 纯度较高,缺点是操作流程较为繁琐,需要使用有毒的有机溶剂,且对实验人员的操作技能要求较高。
基于磁珠表面的特殊基团与 DNA 分子之间的特异性吸附作用,在特定的缓冲液体系中,磁珠能够选择性地吸附 cfDNA,然后通过外加磁场将磁珠与其他杂质分离,再经过洗涤、洗脱等步骤获得纯净的 cfDNA。其优点是操作简便、快速,易于实现自动化,且提取效率较高,可同时处理多个样本。
利用硅胶膜在高盐、低 pH 值条件下对 DNA 的特异性吸附特性,将生物样本中的 cfDNA 吸附到硅胶膜上,而蛋白质、多糖等杂质则被洗脱除去,最后通过低盐、高 pH 值的洗脱液将 cfDNA 从硅胶膜上洗脱下来。该方法操作相对简单,成本较低,适用于小规模样本的提取。
不同生物体液中的 cfDNA 含量和性质存在差异。一般来说,血液中的 cfDNA 含量相对较高,是最常用的样本来源,但不同个体、不同疾病状态下血液 cfDNA 含量也会有所不同。
保存条件
样本采集后若不能及时进行提取,保存条件至关重要。如血液样本一般需在 4℃下保存,长时间放置或保存温度不当可能导致 cfDNA 降解或被核酸酶消化,影响提取效果。
当处理样本数量较少,或处理某些特殊珍惜样本时,由于数量和样本特殊性,更加倾向于使用回收柱,进行回收。当样本数量相对较多,需批量进行处理时,为节省人工成本,避免因人为因素引入的实验误差,更推荐使用磁珠法进行样本处理。
TD476采用回收简石特有回收柱技术进行游离DNA提取回收,可采用传统的离心法进行样本处理,亦可搭配简石真空多联器与真空泵使用,免去繁琐的离心步骤,可以在较短时间内处理较大样本量。
TB476采用磁珠法进行游离DNA提取纯化,可根据客户需求提供兼容磁力架提取的试剂盒,亦可提供预分装,适配高通量提取仪的试剂盒。可供自动化高通量客户进行选择。
【使用介绍】
● 可从 10ml 以内的血清/血浆,1ml 以内的羊水或脑脊液中提取到高纯度的游离 DNA。
● 获得的 DNA 产量高、纯度好,可以直接用于酶切、PCR、高通量测序等分子生物学实验。
● 样品种类: 血清,血浆,羊水和脑脊液(CSF)
● 处理的体积量:
血浆- 单次离心:最多 3ml 两次离心:最多 10ml
血清- 最多 10ml
羊水- 最多 1ml
脑脊液- 最多 1ml
【产品特性】
● DNA 纯度: 获得的 DNA 产量高、纯度好, 可以直接用于 qPCR 高通量测序等各种分子生物学实验。
● DNA 回收情况: 回收的 DNA≥100bp(本试剂盒针对无细胞的 DNA 提取经过优化),总量根据不同的样品个体差异可能会比较大。一般从血清或血浆中提取到的 DNA 浓度在 1-100 ng/ml。
实现最高的cfDNA产量
简单的工作流程
※ 可手动操作完成整个提取流程
※ 兼容主流“开放”自动化平台实现自动化提取

【使用介绍】
● 可从 10ml 以内的血清/血浆,1ml 以内的羊水或脑脊液中提取到高纯度的游离 DNA。
● 获得的 DNA 产量高、纯度好,可以直接用于酶切、PCR、高通量测序等分子生物学实验。
● 样品种类: 血清,血浆,羊水和脑脊液(CSF)
● 处理的体积量:
血浆- 单次离心:最多 3ml 两次离心:最多 10ml
血清- 最多 10ml
羊水- 最多 1ml
脑脊液- 最多 1ml
【产品特性】
● DNA 纯度: 获得的 DNA 产量高、纯度好, 可以直接用于 qPCR 高通量测序等各种分子生物学实验。
● DNA 回收情况: 回收的 DNA≥100bp(本试剂盒针对无细胞的 DNA 提取经过优化),总量根据不同的样品个体差异可能会比较大。一般从血清或血浆中提取到的 DNA 浓度在 1-100 ng/ml。
● 需要的仪器设备:水浴锅或者金属浴(55℃),磁力架,微型离心机或立式离心机。
广泛的样本兼容性
