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实验室内卷:我半天提不出来的质粒,师兄只用了 20 分钟

人阅读 发布时间:2021-05-10 15:48

传统重力法提取,一做就是半天,严重耽误实验进度,常常遇到一顿操作猛如虎,质粒提取仍未果,有时候还会因为内毒素水平的原因,苦苦提了 N 久,却一直达不到实验要求,只能重头再来,有什么方法可以缩减质粒提取的流程,还能提高质粒的纯度呢?

处理时间缩短 7 倍,质粒纯化更简单

ZymoPURE II 是质粒纯化的升级,20 分钟内完成中提大提流程。ZymoPURE II 技术的核心是一种新型的化学试剂和吸附膜的组合,将处理时间缩短 7 倍,从微量离心机柱中洗脱 > 1 mg 质粒 DNA。
                                                                                             

传统质粒提取流程与 ZymoPURE II 质粒纯化耗时对比图
 
酒精沉淀太繁琐,无需去盐洗脱更便捷:使用 ZymoPURE II,将质粒 DNA 结合到离心柱上,并且在用微量离心机洗脱之前洗掉所有污染物。得到的洗脱液可以转染并高度浓缩,因此在洗脱后不需要除去盐并浓缩质粒。

告别滴漏,再见重力法实验时间是最宝贵的,为什么要花费它来等待引力呢?使用 ZymoPURE II,使用真空多联器或离心机在几秒钟内将质粒 DNA 结合到吸附柱上,这完全消除了对慢速重力流柱的需要。
 
更小的洗脱体积、获得更高的产量
                                         
使用 65 倍的柱基质,可使 DNA 增加 6 倍:使用 ZymoPURE II Maxiprep 试剂盒分离的质粒 DNA 的产量和浓度与供应商 Q 的两个分离试剂盒相比。质粒 DNA 从 150 mL 的 JM109 大肠杆菌培养液中分离出来。

与其他主要供应商相比,ZymoPure II Maxiprep 试剂盒中的质粒 DNA 产量和浓度。按照制造商建议的方案(一式两份)从 150 mL 生长过夜的 JM109 大肠杆菌培养物中分离质粒 DNA 。在琼脂糖凝胶电泳后观察一(1)μL 洗脱的质粒 DNA。

疫苗级别的内毒素水平

对比 ZymoPURE II Maximprep 试剂盒与供应商 Q 提供的两个单独试剂盒的内毒素水平

无内毒素质粒 DNA:你确定内毒素不会影响你的结果吗?为什么要冒险?用无内毒素质粒 DNA 重新定义纯度,ZymoPURE Ⅱ 通过简单的吸附柱消除任何不良反应的可能性。内毒素低于 FDA 限值,适用于敏感的转染实验和体内实验。

彩色的溶液使裂解环节准确无误
 

采用获得专利的多色缓冲系统,可直接观察细胞的裂解和中和环节,以防止加错试剂

适用范围更广

ZymoPURE Ⅱ 适用领域广泛,选择更简单   
         
适用于敏感技术 

客户满意度高,好评不断 



客户数据表明分离的质粒 DNA 达到转染要求:V.B. 在科隆大学生成的数据。使用 ZymoPURE™ Midiprep 试剂盒,ZymoPURE™ Maxiprep 试剂盒或 NucleoBond Xtra Midi 试剂盒,用从 2 mL 细菌培养物中分离的 2 或 4 μg 的 pCI-neo+GFP 质粒转染接种在 6 孔板中的 HeLa 细胞。来自 Macherey-Nagel。48 小时后,使用蛋白质印迹和 Ponceau S 染色在细胞裂解物中确认 GFP 表达。还用针对 α-微管蛋白的抗体探测印迹以验证样品的平均负载。

     
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